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細(xì)胞的復(fù)蘇及凍存方法一.細(xì)胞復(fù)蘇與培養(yǎng)將液氮或-80℃保存的腫瘤細(xì)胞于37℃水浴，快速溶化，用8.0ml培養(yǎng)基混勻已融化的腫瘤細(xì)胞懸液，于1500轉(zhuǎn)/分，離心3分鐘。棄上清，再吸取8.0ml培養(yǎng)基質(zhì)混勻細(xì)胞沉淀，再1500轉(zhuǎn)/分，離心3分鐘，棄上清，細(xì)胞沉淀用1.0ml培養(yǎng)基混勻，備用。另取一個(gè)75cm2方瓶，加入14.0ml培養(yǎng)基質(zhì)，將上述制備的含腫瘤細(xì)胞懸液（1.0ml）加入此方瓶中，于37℃，5%CO2孵育箱中培養(yǎng)。若此腫瘤細(xì)胞懸浮生長(zhǎng)，大約3－4天細(xì)胞基質(zhì)會(huì)變黃，5....

美國(guó)國(guó)家綜合癌癥網(wǎng)絡(luò)（NCCN）老年腫瘤指南中老年患者是指65歲以上的腫瘤患者。根據(jù)美國(guó)監(jiān)測(cè)、流行病學(xué)與zui終結(jié)果（SEER）數(shù)據(jù)庫(kù)結(jié)果顯示：在美國(guó)乳腺癌發(fā)病人群中，65歲以上老年患者占到近50%，70歲以上占47%。我國(guó)乳腺癌發(fā)病年齡具有年輕化特點(diǎn)，老年患者所占比例達(dá)不到一半，但由于我國(guó)人口基數(shù)大，老年乳腺癌患者仍是一個(gè)很大群體，不能忽視?，F(xiàn)將老年乳腺癌患者的特點(diǎn)及近年各種治療的研究進(jìn)展作一綜述。1老年乳腺癌患者的特點(diǎn)1.1老年乳腺癌患者的生物學(xué)特性臨床發(fā)現(xiàn)雖然老年乳腺癌...

ATCC菌種保藏的重要意義就在于盡可能保持其原有性狀和活力的穩(wěn)定，確保菌種不死亡、不變異、不被污染，以達(dá)到便于研究、交換和使用等諸方面的需要。ATCC菌種保藏的方法有哪些呢?傳代保存法有些微生物當(dāng)遇到冷凍或干燥等處理時(shí)，會(huì)很快死亡，因此在這種情況下，只能求助于傳代培養(yǎng)保存法。傳代培養(yǎng)就是要定期地進(jìn)行菌種轉(zhuǎn)接、培養(yǎng)后再保存，它是zui基本的微生物保存法，例如酸奶等常用生產(chǎn)ATCC菌種的保存。傳代保存時(shí)，培養(yǎng)基的濃度不宜過(guò)高，營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的...

ATCC細(xì)胞株在培養(yǎng)瓶長(zhǎng)成致密單層后，已基本上飽和，為使細(xì)胞能繼續(xù)生長(zhǎng)，同時(shí)也將細(xì)胞數(shù)量擴(kuò)大，就必須進(jìn)行傳代（再培養(yǎng)）。傳代培養(yǎng)也是一種將細(xì)胞種保存下去的方法。同時(shí)也是利用培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)的必經(jīng)過(guò)程。懸浮型細(xì)胞直接分瓶就可以，而貼壁細(xì)胞需經(jīng)消化后才能分瓶。ATCC細(xì)胞株一般使用蛋白水解酶（比如胰蛋白酶）消化貼壁細(xì)胞成單個(gè)細(xì)胞，也可加入乙二胺四乙酸（EDTA）提高消化能力，EDTA是一種二價(jià)離子的螯合劑，能抑制細(xì)胞膜上的Ca2+和Mg2+。常用的細(xì)胞消化液一般含有0.25%...

ATCC細(xì)胞株污染是實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)中常見(jiàn)的污染，即使在細(xì)胞培養(yǎng)液中加入了抗菌素，也可能因?yàn)椴僮鞑簧鞫鹞廴?。zui常見(jiàn)的有革蘭氏陽(yáng)性菌，如枯草桿菌以及大腸桿菌、假單胞菌等革蘭氏陰性菌，其中又以白色葡萄球菌較常見(jiàn)。培養(yǎng)細(xì)胞受細(xì)菌污染后，會(huì)出現(xiàn)培養(yǎng)液變混濁，pH改變。污染后細(xì)胞發(fā)生病理改變，胞內(nèi)顆粒增多、增粗，zui后變圓脫落死亡。真菌污染是ATCC細(xì)胞株培養(yǎng)過(guò)程中zui常見(jiàn)的一種，zui常見(jiàn)的真菌有煙曲霉、黑曲菌、孔子霉、毛霉菌、白色念珠菌和酵母菌。培養(yǎng)細(xì)胞受真菌污染后，可見(jiàn)...

黑色素瘤細(xì)胞株在培養(yǎng)瓶長(zhǎng)成致密單層后，已基本上飽和，為使細(xì)胞株能繼續(xù)生長(zhǎng)，同時(shí)也將細(xì)胞株數(shù)量擴(kuò)大，就必須進(jìn)行傳代（再培養(yǎng)）。傳代培養(yǎng)也是一種將細(xì)胞株種保存下去的方法。同時(shí)也是利用培養(yǎng)黑色素瘤細(xì)胞株進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)的必經(jīng)過(guò)程。懸浮型黑色素瘤細(xì)胞株直接分瓶就可以，而貼壁細(xì)胞株需經(jīng)消化后才能分瓶。一般使用蛋白水解酶（比如胰蛋白酶）消化貼壁細(xì)胞株成單個(gè)細(xì)胞株，也可加入乙二胺四乙酸（EDTA）提高消化能力，EDTA是一種二價(jià)離子的螯合劑，能抑制黑色素瘤細(xì)胞株膜上的Ca2+和Mg2+。常用的...

黑色素瘤細(xì)胞株是從一個(gè)經(jīng)過(guò)生物學(xué)鑒定的細(xì)胞系或原代培養(yǎng)物用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過(guò)篩選的方法，克隆具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志的單細(xì)胞獲得的細(xì)胞群，稱(chēng)細(xì)胞株。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。描述一個(gè)黑色素瘤細(xì)胞株時(shí)，必須說(shuō)明它的特殊性質(zhì)或標(biāo)志。與細(xì)胞系類(lèi)似，如果不能繼續(xù)傳代或傳代代數(shù)有限，可稱(chēng)為“有限細(xì)胞株（finitecellstrain）”。如果可以連續(xù)傳代，則可稱(chēng)為“連續(xù)細(xì)胞株（continouscellstrain）”。再由原細(xì)胞株進(jìn)一步分離培養(yǎng)出與原株性狀不同的...

LWnt-3A小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞信息由于這種條件培養(yǎng)基還包含Wnt-3A蛋白外的其他因子，對(duì)于涉及Wnt-3A條件培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)有必要用其來(lái)源細(xì)胞株(ATCCCRL-2648)作對(duì)照。L-M(TK-)cells(ATCCCCL-1.3)用Wnt-3A表達(dá)載體轉(zhuǎn)染并在含G418的培養(yǎng)基中篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株。Wnt-3A基因編碼一個(gè)有變異的信號(hào)功效分泌性糖蛋白。Wnt基因控制胚胎發(fā)過(guò)程中的許多模式形成和生長(zhǎng)事件。這些細(xì)胞分泌有生物活性的Wnt-3A蛋白。它們是目前生產(chǎn)Wnt-3A條件培養(yǎng)...